2025-07-12 03:04:39
免疫組化技術有哪些應用?
定位和定性是免疫組化比較大的優勢。相比于其他蛋白檢測方法,免疫組化具有定位較直接準確、定性靈敏度高,是定位檢測分析優先方法,尤其對于有些因子的轉位研究十分有用。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面:惡性**的診斷與鑒別定性;確定轉移性惡性**的原發部位;對某類**進行進一步的病理分型;軟組織**診斷;為臨床提供**方案的選擇;近年來,隨著免疫組織化學技術的發展和各種特異性抗體的出現,使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可,其在低分化或未分化**的鑒別診斷時,準確率可達50%-75%。
病理報告中的免疫組化到底有什么作用?吉林動物組織免疫組化可以做什么
免疫組化的優缺點
免疫組化的優點在于其高特異性和敏感性,能夠在組織原位檢測目標蛋白的表達和分布。此外,免疫組化可以與其他技術(如熒光顯微鏡、電子顯微鏡)結合,提供更豐富的信息。然而,免疫組化也存在一些缺點。首先,實驗步驟復雜,需要優化多個參數(如一抗濃度、孵育時間)。其次,免疫組化的結果可能受到組織固定、抗原修復等因素的影響,導致假陽性或假陰性結果。此外,免疫組化的定量分析相對困難,通常只能進行半定量分析。 新疆病理免疫組化哪家好如何做好免疫組化實驗?
細胞爬片免疫組化檢測實驗步驟
1、選擇貼壁良好的細胞爬片,用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干。
2、PBS洗3次,每次5min。3、切片放入3%過氧化氫溶液,室溫下孵育10min,以阻斷內源性過氧化物酶。
4、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封閉20min(封閉電荷)。
5、去除BSA液,每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,4℃過夜。
6、PBS洗3次,每次5min。
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7、去除PBS液,每張切片加50μl-100μl相應種屬的二抗,4℃孵育50min。
8、PBS洗3次,每次5min。
9、去除PBS液,每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液,顯微鏡控制顯色。
10、顯色完全后,蒸餾水或自來水沖洗,蘇木素復染,1%鹽酸酒精分化(1s),自來水沖洗,氨水返藍,流水沖洗。
11、切片經過梯度酒精(70-**)10min一個梯度,脫水干燥,二甲苯透明,中性樹膠封固。
免疫組化實驗所用的組織和細胞標本是什么樣的?
實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理大片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標本**常用、**基本的方法,對于組織形態保存好,且能作連續切片,有利于各種染色對照觀察;還能長期存檔,供回顧性研究;石蠟切片制作過程對組織內抗原暴露有一定的影響,但可進行抗原修復,是免疫組化中優先的組織標本制作方法。
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免疫組化中免疫膠體金技術,英瀚斯生物小編為您說明介紹。免疫膠體金技術是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標記物。膠體金是指金的水溶膠,它能迅速而穩定地吸附蛋白,對蛋白的生物學活性則沒有明顯的影響。因此,用膠體金標記一抗、二抗或其他能特異性結合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針,就能對組織或細胞內的抗原進行定性、定位,甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒,且膠體金的電子密度高,所以免疫膠體金技術特別適合于免疫電鏡的單標記或多標記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色,因此也適合進行光鏡觀察。如應用銀加強的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。英瀚斯生物實驗外包,多種病理染色熟練掌握,可做免疫組化!湖北大鼠免疫組化注意事項
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免疫組化有哪幾種分類 ?
1)按標記物質的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標法和免疫金銀法等。
2)按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。
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3)按結合方式可分為抗原-抗體結合,如過氧化物酶-抗過氧化物酶(PAP)法;親和連接,如卵白素-生物素-過氧化物酶復合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(SP)法等,其中SP法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用型二步法,此方法尤其適合于內源性生物素含量高的組織抗原檢測。 吉林動物組織免疫組化可以做什么