2025-07-11 00:18:34
免疫組化指的是根據抗體與抗原特異結合的原理來檢測組織切片中的抗原(如蛋白)。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體,而histo意味著組織。另一種類似的技術是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,簡稱ICC)。這兩個詞大家經常混著用,看著好像差不多,但實際上還是有點區別。IHCvsICC對于IHC,組織是來自患者或動物,經過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,封片后再處理。通過這種方法,研究人員可觀察細胞組分的定位,同時維持周圍組織的原先結構。對于ICC,大部分細胞外基質及其他基質組分被去除,只剩下整個細胞來染色。ICC的來源可以是細胞懸液,來自患者或動物(如血涂片、拭子等),或在實驗室中進行的組織培養細胞系。 免疫組化檢測多少錢?福建做得好的免疫組化推薦
免疫組化有哪幾種分類 ?
1)按標記物質的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標法和免疫金銀法等。
2)按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。
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3)按結合方式可分為抗原-抗體結合,如過氧化物酶-抗過氧化物酶(PAP)法;親和連接,如卵白素-生物素-過氧化物酶復合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(SP)法等,其中SP法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用型二步法,此方法尤其適合于內源性生物素含量高的組織抗原檢測。 內蒙古靠譜免疫組化檢測有沒有推薦的免疫組化外包公司?
臨床應用中,藥物靶點免疫組化,英瀚斯生物專業做實驗外包服務,一站式醫學科研平臺。免疫組化及分子病理學方法在疾病診斷中只只起輔助**的作用,而藥物病理學是用病理學的方法確定藥物**的靶點、評價藥物**的療效、預測藥物**的反應,因此藥物靶點免疫組化屬“單獨的診斷”。因此對于對照的設置、質量的控制均需要更高的要求,如對試劑的要求,不同于一般的診斷試劑,應按對藥物管理的要求操作。HER2蛋白著色3+者可作為臨床醫生建議患者接受曲妥珠單抗等藥物**的依據。
免疫組化在在病理診斷中,隨著各種抗體新的用途不斷被發現及越來越多的新型抗體的出現,免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷、分類、預后判斷等方面產生了重大的影響。由于免疫組化技術也存在一些局限性,因此,深入研究免疫組化原理和技術,并努力實現規范化的操作,才能充分發揮免疫組化在病理的診斷及鑒別診斷、判斷預后、指導臨床**中的作用。
觀察組織切片中抗原的數量及其在組織中的分布情況,對抗原進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學,由于抗原與抗體特異性結合,因此通過免疫組化使標記抗體的顯色劑(酶、熒光素、同位素、金屬離子等等)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質)。IHC所用標本主要為兩大類:組織標本和細胞標本,其中制作組織標本更常用、更基本的方法是石蠟切片。石蠟切片對于組織形態保存好,有利于各種染色對照觀察,而且能長期保存;石蠟切片中使用的甲醛固定劑對組織內抗原暴露有一定的影響,但可進行抗原修復,是免疫組化中優先選擇的組織標本制作方法。 英瀚斯生物為您詳解免疫組化實驗指南!
英瀚斯生物為您整理免疫組化實驗步驟
1、石蠟切片置于65℃烘箱中烘片2h,脫蠟至水,用PBS沖洗三次,每次5min。
2、切片置于EDTA緩沖液中微波修復,中火至沸后斷電,間隔10min低火至沸。
3、自然冷卻后PBS洗3次,每次5min。4、切片放入3%過氧化氫溶液,室溫下孵育10min,以阻斷內源性過氧化物酶。
5、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封閉20min(封閉電荷)。
6、去除BSA液,每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,4℃過夜。
7、PBS洗3次,每次5min。
8、去除PBS液,每張切片加50μl-100μl相應種屬的二抗,4℃孵育50min。
9、PBS洗3次,每次5min。
10、去除PBS液,每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液,顯微鏡控制顯色。
11、顯色完全后,蒸餾水或自來水沖洗,蘇木素復染,1%鹽酸酒精分化(1s),自來水沖洗,氨水返藍,流水沖洗。
12、切片經過梯度酒精(70-**)10min一個梯度,脫水干燥,二甲苯透明,中性樹膠封固。 免疫組化公司哪家好?陜西切片免疫組化要多少錢
做免疫組化的目的是什么?福建做得好的免疫組化推薦
**和預后有關的免疫組化。與**及預后有關的標記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化、術后殘存cancer灶呈正相關;乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高,PTEN基因表達減弱,提示cancer預后不良。(2)細胞增殖性標記物:cancer細胞增生是否活躍直接影響著臨床的**與預后,如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對cancer細胞的增生做出評價,表達指數越高,表明其增殖指數越活躍,惡性度增高,預后不良,其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發現Ki-67、EGFR陽性者,淋巴結轉移率高,并與ji素受體的表達呈負相關。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,應用更為范圍廣的的是子宮內膜cancer及乳腺cancer,如對乳腺cancer中ER、PR的檢測,有助于決定臨床**中是否需要加入內分泌ji素阻斷**,并能判斷預后,ER及PR陽性表達、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達病例對三苯氧胺等ji素**反應良好,而ERPR、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。福建做得好的免疫組化推薦