2025-07-02 04:20:51
放入 PCR 儀:將配置好的反應管放入基因擴增儀 PCR 儀中,按照設定的程序進行擴增反應。設置擴增程序:一般包括預變性、變性、退火、延伸和終延伸等步驟。預變性步驟通常在 94℃-95℃下進行 5-10 分鐘,使 DNA 雙鏈充分解開;變性溫度一般為 94℃-95℃,時間為 30-60 秒,使模板 DNA 雙鏈解鏈;退火溫度根據引物的 Tm 值確定,一般在 50℃-65℃之間,時間為 30-60 秒,使引物與模板 DNA 特異性結合;延伸溫度通常為 72℃,時間根據擴增片段長度而定,一般為 1-2 分鐘 /kb;終延伸步驟在 72℃下進行 5-10 分鐘,確保所有擴增產物延伸完整。循環次數一般為 30-40 次。Q9604充分考慮了用戶的需求,直觀的操作界面和簡便的程序設置,降低了實驗的復雜性,提高了數據的可靠性。南京雙槽基因擴增儀PCR儀要多少錢
1. **參數溫度均勻性:各孔位溫度差異≤0.5℃,避免擴增效率不一致。熱循環重復性:多次運行同一程序時,溫度曲線重合度高,保證實驗可重復性。兼容性:支持不同規格反應管(如 0.2mL 管、96 孔板)和試劑體系(如 Taq 酶、高保真酶)。2. 選型建議科研場景:梯度 PCR 儀 + 低通量模塊,便于優化反應條件。臨床檢測:高通量普通 PCR 儀或 qPCR 儀,兼顧效率和定量需求。野外或現場檢測:便攜式 PCR 儀(如基于微流控芯片,電池供電),適合應急檢測(如**防控)。南京定量基因擴增儀PCR儀價格基因組學和分子生物學研究不斷深入,實時熒光定量PCR技術的需求持續增加,成為高通量基因檢測的理想選擇。
科研與分子生物學基因表達譜分析應用:通過 RT-PCR 同時檢測多個基因在不同樣本中的表達差異(如**組織芯片研究)。高通量測序文庫制備應用:擴增 DN**段用于二代測序(NGS)建庫,提升測序前處理效率。3. 農業與生物技術轉基因作物批量檢測應用:同時篩查多種作物樣本的外源基因(如抗蟲基因Bt),符合監管機構的高通量檢測需求。畜禽疫病快速篩查應用:批量檢測生豬、禽類的病原體(如非洲豬瘟病毒、禽流感病毒),助力養殖場疫病防控。
準備試劑:準備 PCR 反應所需的各種試劑,包括 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、緩沖液、引物、Mg??等。引物是決定 PCR 特異性的關鍵因素,需根據待檢測的轉基因成分的特定基因序列設計合成特異性引物。配置反應液:按照一定的比例和順序,將各種試劑加入到無菌的 PCR 管中,配置成 PCR 反應體系。一般反應體系包括 10×PCR 緩沖液、2.5mmol/L dNTPs、25mmol/L MgCl?、10μmol/L 引物、5U/μL Taq DNA 聚合酶以及適量的模板 DNA,總體積通常為 20μL 或 50μL。RePure-A的智能故障檢測和報警系統,能夠及時提醒用戶在實驗過程中可能出現的問題,確保實驗過程順利進行。
在基因功能、調控機制等基礎研究中,qPCR是不可或缺的工具,主要用于基因表達水平的定量分析。基因表達分析:通過定量比較不同組織、不同發育階段或不同處理條件下目的基因的mRNA表達量,探究基因的功能及調控機制。例如,研究某種藥物對細胞中特定基因表達的影響,或比較正常組織與病變組織中基因表達的差異。基因分型與SNP分析:結合特異性探針或引物,可對單核苷酸多態性(SNP)進行快速分型,用于研究基因多態性與疾病易感性、藥物反應差異等的關聯。基因拷貝數變異(CNV)分析:檢測基因組中特定基因的拷貝數是否異常,為研究染色體結構變異與疾病的關系提供數據支持。RePure-T配備了三槽設計,允許用戶在同一次實驗中同時進行多個反應。南京QPCR基因擴增儀PCR儀功能
擴增效果出色的柏恒RePure系列PCR儀能高度靈敏地擴增目標DNA序列,為實驗結果的準確性和可重復性提供保障。南京雙槽基因擴增儀PCR儀要多少錢
儀器操作設置放置樣品板:將密封好的 96 孔板平穩放入 qPCR 儀的樣品槽,確保孔位對齊,蓋緊儀器艙門。程序設置(通過儀器軟件):預變性:通常 95℃,30 秒 - 5 分鐘(熱啟動酶,使模板完全變性)。循環階段(變性→退火→延伸,同時采集熒光):變性:95℃,5-15 秒(使 DNA 解鏈)。退火 / 延伸:根據引物 Tm 值設置溫度(一般 55-65℃),20-30 秒(引物結合并延伸,熒光染料 / 探針在此階段發光)。循環次數:通常 35-40 次(根據模板濃度調整)。溶解曲線(可選):用于驗證擴增產物特異性,程序為 95℃ 15 秒→60℃ 1 分鐘→緩慢升溫至 95℃,同時連續采集熒光(觀察是否有單一峰,排除非特異性擴增或引物二聚體)。熒光通道選擇:根據使用的熒光染料 / 探針類型選擇(如 SYBR GreenⅠ 對應 FAM 通道,TaqMan 探針根據標記熒光選擇)。樣本信息錄入:在軟件中標記樣品類型(如標準品、未知樣本、陰性對照、空白對照)及孔位對應關系。南京雙槽基因擴增儀PCR儀要多少錢